Efecto del nitrato de plata (AgNO3) en el crecimiento in vitro de brotes de Anthurium magnificum Linden

Anthurium magnificum Linden es una importante planta ornamental perteneciente a la familia Araceae. Esta especie es muy demandada como planta de maceta para la decoración de interiores y jardines, así como follaje de corte. Los métodos de propagación tradicionales en esta especie presentan ciertas desventajas por lo que no permiten satisfacer la creciente demanda. Estas limitantes convierten al cultivo de tejidos vegetales en el método más eficiente para propagar plantas de Anthurium magnificum a un ritmo más rápido que los métodos de propagación convencionales. En el cultivo de tejidos vegetales el nitrato de plata adicionado a los medios de cultivo actúa como un inhibidor de la acción del etileno y desempeña un papel crucial en la regulación de procesos fisiológicos esenciales de las plantas. El presente trabajo tuvo como objetivo determinar el efecto de diferentes concentraciones de nitrato de plata en el crecimiento in vitro de brotes de Anthurium magnificum. Para ello, se cultivaron brotes in vitro de Anthurium magnificum en medios de cultivo enriquecidos con diferentes concentraciones de nitrato de plata. Los resultados mostraron que los mayores valores en las variables altura de la planta, número de raíces y longitud de las raíces se obtuvieron en un medio de cultivo con 1,0 mg L-1 de nitrato de plata. En la variable área foliar de la planta los mayores valores se presentaron en los medios de cultivo que contenían nitrato de plata independientemente de la concentración empleada.

Anthurium magnificum Linden is an important ornamental plant belonging to the Araceae family. This species is in great demand as a pot plant for interior and garden decoration, as well as cut foliage. The traditional propagation methods in this species have certain disadvantages, which is why they cannot satisfy the growing demand. These limitations make plant tissue culture the most efficient method to propagate Anthurium magnificum plants at a faster rate than conventional propagation methods. In the culture of plant tissues, silver nitrate added to the culture media acts as an inhibitor of the action of ethylene and plays a crucial role in the regulation of essential physiological processes in plants. The objective of this work was to determine the effect of different concentrations of silver nitrate on the in vitro growth of Anthurium magnificum shoots. For this, in vitro shoots of Anthurium magnificum were cultivated in culture media enriched with different concentrations of silver nitrate. The results showed that the highest values in the variables plant height, number of roots and length of the roots were obtained in a culture medium with 1.0 mg L-1 of silver nitrate. In the variable leaf area of the plant, the highest values were presented in the culture media that contained silver nitrate, regardless of the concentration used.

High frequency of larval abnormalities of the toad Rhinella arenarum (Anura: Bufonidae) in an Argentinian agroecosystem

Introduction: The frequent use of pesticides is currently considered a cause of environmental pollution due to the high rate of entry of these substances into agroecosystems. This constitutes a risk for the species that inhabit these ecosystems, in particular anurans whose characteristics make them prone to exposure to and interaction with environmental pollutants. Objective: To report the occurrence of abnormalities in larvae of the common toad Rhinella arenarum inhabiting ponds surrounded by agroecosystems. Methods: In two consecutive springs (2015 and 2016), reproductive events of common toads were monitored in temporary pond systems in agricultural and non-agricultural areas, located near the city of La Plata (Buenos Aires, Argentina). The physicochemical parameters of the ponds were measured, and the stage of each reproductive event was recorded, such as the numbers of adult toads, amplexus and clutches. In the laboratory, the larvae were measured and photographed, their stage of development was recorded, and their morphology was examined under a stereomicroscope. Representative samples (normal and abnormal) from each pond studied were processed for histopathological analysis. Results: In the field studies carried out on a population of R. arenarum collected in an agroecosystem, a lower number of reproductive adults and clutches were observed in relation to the population of a non-agricultural pond. A total of 1 910 larvae were collected: 529 and 1 381 larvae from ponds located in non-agricultural and agricultural areas, respectively. Larvae from the agroecosystem showed two types of abnormalities: severe tail flexure and abdominal bloating. In addition, five degrees of severity could be determined in relation to abdominal bloating. Conclusions: This work reports the high frequency and severity of abnormalities observed in the early stages of R. arenarum larvae living within an agroecosystem, providing evidence of the negative impact that agricultural activities cause on aquatic ecosystems surrounded by farming areas.

Introducción: El uso frecuente de plaguicidas es considerado actualmente una causa de contaminación ambiental debido a las altas tasas de ingreso de estas sustancias a los agroecosistemas. Esta situación es un riesgo para las especies que habitan en estos ecosistemas, en particular los anuros cuyas características los hacen propensos a la exposición e interacción con contaminantes ambientales. Objetivo: Informar la presencia de anormalidades en larvas del sapo común Rhinella arenarum que habitan en estanques rodeados por un agroecosistema. Métodos: En dos primaveras consecutivas (2015 y 2016), se monitorearon los eventos reproductivos del sapo común proveniente de sistemas de estanques temporales ubicados en zonas agrícolas y no agrícolas, cerca de la ciudad de La Plata (Buenos Aires, Argentina). Se midieron los parámetros fisicoquímicos de los estanques y se registraron las etapas de cada evento reproductivo como el número de sapos adultos, amplexos y nidadas. En el laboratorio, las larvas fueron medidas y fotografiadas, se registró su estado de desarrollo y se examinó la morfología de cada una bajo microscopio estereoscópico. Se procesaron muestras representativas (normales y anormales) de cada estanque estudiado para análisis histopatológico. Resultados: En la población de R. arenarum que vive dentro de un agroecosistema, se observó un menor número de adultos reproductores y puestas en relación con la del estanque en la zona no agrícola. Se recolectaron un total de 1 910 larvas: 529 y 1 381 larvas de estanques ubicados en zonas no agrícolas y agrícolas, respectivamente. Las larvas del agroecosistema mostraron dos tipos de anormalidades: severa flexión de la cola y distensión abdominal. Además, se pudo determinar cinco grados de gravedad en relación con la distensión abdominal. Conclusiones: Una alta frecuencia y severidad de anormalidades en los estadios tempranos de larvas de R. arenarum que viven dentro de un agroecosistema proporciona evidencia del impacto negativo que las actividades agrícolas causan en los ecosistemas acuáticos rodeados por áreas de cultivo.

The Comparative Anatomy of the Upper Digestive System in 26 Species of Zoophagous-Polyphagous Palearctic Birds / Anatomía Comparada del Sistema Digestivo Superior en 26 Especies de Aves Paleárticas Zoófagas-Polífagas

SUMMARY: Birds are the most diversified organisms on Earth, with species covering various niches in each major biome, being essential to understand the modern ecosystem. This study concentrates on the diversification of the anatomical structure of the upper digestive tract for 26 species of zoophage-polyphagous birds and the anatomical differences in the digestive system to reveal aspects related to their evolution and diversification. The trophic spectrum of the selected birds includes several categories of food, or, as in the case of strictly carnivorous birds, to a single food category. After performing the dissections, the digestive tract was separated from the carcass and each digestive segment was measured and analysed. In this study, it was demonstrated that the birds' feeding behaviour influence the macroscopic particularities of the digestive system, more visible in the cranial portion (oropharyngeal cavity, esophagus, proventriculus and gizzard), with little descriptive information in the literature. The tongue is poorly developed and immobile in piscivorous birds, while the tongue of insectivorous birds is long and moves considerably away from the tip of the bill. The esophagus was stretchable and presents longitudinal folds on its entire surface in piscivorous species and not extensible in insectivorous birds.

Las aves son los organismos más diversificados de la Tierra, con especies que cubren varios nichos en cada bioma principal, siendo esenciales para comprender el ecosistema moderno. Este estudio se concentra en la diversificación de la estructura anatómica del tracto digestivo superior para 26 especies de aves zoófago-polífagas y las diferencias anatómicas en el sistema digestivo para revelar aspectos relacionados con su evolución y diversificación. El espectro trófico de las aves seleccionadas incluye varias categorías de alimentos o, como en el caso de las aves estrictamente carnívoras, una sola categoría de alimentos. Después de realizar las disecciones, se separó el tracto digestivo de la canal y se midió y analizó cada segmento digestivo. En este estudio se demostró que el comportamiento alimentario de las aves influye en las particularidades macroscópicas del sistema digestivo, más visibles en la porción craneal (cavidad orofaríngea, esófago, proventrículo y molleja), con poca información descriptiva en la literatura. En las aves piscívoras, la lengua está poco desarrollada e inmóvil, mientras que la lengua de las aves insectívoras es larga y se aleja considerablemente de la punta del pico. El esófago era estirable y presentaba pliegues longitudinales en toda su superficie en especies piscívoras y no extensible en aves insectívoras.

Cultivo de Acanthamoeba spp. en agua apirógena / Acanthamoeba spp. culture in pyrogen-free water / Cultura de Acanthamoeba spp. em água apirogênica

Resumen El objetivo de este estudio fue evaluar el cultivo de cepas de Acanthamoeba spp. en agua destilada estéril apirógena de uso farmacéutico. Se utilizaron dos cepas de genotipo T4 [un aislamiento de encefalitis granulomatosa amebiana (EGA) y una ambiental] y cepas correspondientes a los genotipos T5 y T15. Los quistes de cada una de las cepas se sembraron en placas de Petri con agar no nutritivo con diferentes soluciones (agua destilada estéril apirógena uso médico para preparaciones inyectables, agua destilada filtrada, medio Page) y combinados con suspensiones de Escherichia coli. Las placas se incubaron a 37 °C y se monitorearon diariamente durante 15 días para la detección de trofozoítos. El crecimiento se evaluó mediante examen microscópico directo. Cada cultivo contó con cuatro repeticiones para cada una de las cepas (n=96). En conclusión, se hallaron diferencias estadísticamente significativas en el crecimiento de las cepas por día. Las cepas T5 y T4 (encefalitis amebiana granulomatosa) desarrollaron mayor cantidad de trofozoítos en el primer día respecto de la cepa T15 (H=16,42; p=0,001). En el agua apirógena con E. coli se obtuvo un crecimiento igual a la solución de Page con E. coli (H=24,64; p=0,0001). No se hallaron diferencias estadísticamente significativas en la cantidad de trofozoítos obtenidos en agua apirógena con E. coli y solución de Page con E. coli en la cepa T4 (EGA) (U=4; p<0,05) pero sí en la cepa T4 ambiental (U=0; p<0,05).

Abstract The objective of this study was to evaluate the culture of strains of Acanthamoeba spp. in sterile apyrogenic distilled water for pharmaceutical use. Two T4 genotype strains [one isolate of granulomatous amebic encephalitis (GAE) and one environmental], a T5 and T15 genotype strains were used. The cysts of each of the strains were seeded in Petri dishes with non-nutritive agar with different solutions (pyrogenic sterile distilled water for medical use for injectable preparations, filtered distilled water, Page medium) and combined with Escherichia coli suspensions. Plates were incubated at 37 °C and monitored daily for 15 days for the detection of trophozoites. Growth was assessed by direct microscopic examination. Each medium culture counted four replicates for each of the strains (n=96). Concluding, statistically significant differences were found in the growth of the strains per day. Strains T5 and T4 (granulomatous amebic encephalitis) developed a greater number of trophozoites on the first day compared to strain T15 (H=16.42; p=0.001). In apyrogenic water with E. coli, a growth equal to Page's solution with E. coli was obtained (H=24.64; p=0.0001). No statistically significant differences were found in the amount of trophozoites obtained in apyrogenic water with E. coli and Page's solution with E. coli in strain T4 (GAE) (U=4; p<0.05), but significant differences were found in the environmental T4 strain (U=0; p<0.05).

Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar o cultivo de cepas Acanthamoeba spp. em água destilada apirogênica estéril para uso farmacêutico. Foram utilizadas duas cepas de genótipo T4 [um isolamento de encefalite granulomatosa amebiana (EGA) e uma ambiental], e cepas correspondentes aos genótipos T5 e T15. Os cistos de cada uma das cepas foram semeados em placas de Petri com ágar não nutritivo com diferentes soluções (água destilada estéril apirogênica para uso médico para preparações injetáveis, água destilada filtrada, meio Page) e combinados com suspensões de Escherichia coli. As placas foram incubadas a 37 °C e monitoradas diariamente durante 15 dias para detecção de trofozoítos. O crescimento foi avaliado através de exame microscópico direto. Cada cultura contou com quatro réplicas para cada uma das cepas (n=96). Em conclusão, diferenças estatisticamente significativas foram encontradas no crescimento das cepas por dia. As cepas T5 e T4 (encefalite amebiana granulomatosa) desenvolveram maior número de trofozoítos no primeiro dia em relação à cepa T15 (H=16,42; p=0,001). Em água apirogênica com E. coli, foi obtido crescimento igual ao da solução de Page com E. coli (H=24,64, p=0,0001). Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas na quantidade de trofozoítos obtidos em água apirogênica com E. coli e solução de Page com E. coli na cepa T4 (EGA) (U=4; p%<0,05), mas sim na cepa T4 ambiental (U=0; p<0,05).

Desarrollo y validación de un método de suspensión basado en células Vero para la detección del virus Zika / Development and validation of a vero cell-based suspension method for the detection of Zika virus

Objetivo . Desarrollar y validar un método de suspensión celular utilizando células Vero 76 para el cultivo del virus Zika (ZIKV) basado en la infección de células recién sembradas no adheridas. Material y métodos . Se utilizaron tres multiplicidades de infección diferentes del ZIKV para desarrollar y comparar este novedoso método con el método estándar de monocapa de células confluentes. Además, validamos preliminarmente el método de suspensión utilizando muestras clínicas caracterizadas como positivas o negativas para el ZIKV. El método estándar de monocapa se utilizó como método de referencia, y el aislamiento viral se confirmó mediante un RT-PCR específico del ZIKV. Se estimó la sensibilidad e intervalos de confianza del 95% para el método de suspensión. Asimismo, se realizó una comparación técnica del método de suspensión contra el método de monocapa. Resultados . Nuestros hallazgos sugieren que tanto la carga viral como la replicación del ZIKV fueron comparables entre los métodos de infección en monocapa y en suspensión. Aunque ambos métodos fueron adecuados para cultivar y aislar el ZIKV, el método de suspensión se caracterizó por ser más fácil, barato y rápido, así como una técnica de aislamiento sensible. En comparación con el método de monocapa, el método de suspensión fue cuatro veces más sensible en la detección del ZIKV en casos inconclusos por RT-PCR. Conclusiones . El método de suspensión tiene el potencial de ser un método eficaz para cultivar y aislar el ZIKV y su uso es potencialmente útil tanto en la investigación como en entornos clínicos.

Objective. To develop and validate a cell suspension method using Vero 76 cells for culturing Zika virus (ZIKV) based on infection of detached freshly seeded cells. Material and methods. Three different multiplicities of infection of ZIKV were used to develop and compare this novel method to the standard confluent cell monolayer method. In addition, we preliminary validated the cell suspension method using well-characterized ZIKV positive and negative clinical samples. The standard confluent cell monolayer method was used as the reference method, and viral isolation was confirmed by a ZIKV-specific RT-PCR. The sensitivity and its 95% confidence intervals for the cell suspension method were estimated. Also, a technical comparison of the cell suspension method against the cell monolayer method was performed. Results. Our findings suggested that both the viral load and replication of ZIKV were comparable between both monolayer- and suspension-infection methods. Although both methods were suitable for culturing and isolating ZIKV, the cell suspension method was easier, cheaper, and quicker as well as a sensitive isolation technique. The cell suspension method was significantly more sensitive in detecting Zika in inconclusive cases by RT-PCR, with a fourfold increase compared to the confluent cell monolayer method. Conclusion. The cell suspension method has the potential to be an effective method for cultivating and isolating ZIKV and its application is potentially useful in both research and clinical settings.

Ex situ culture of coral species Porites lobata (Scleractinia: Poritidae) and Pocillopora damicornis (Scleractinia: Pocilloporidae), Costa Rica: first assessment and implications

Introduction: Coral reefs worldwide decline has prompted coral restoration as a viable strategy to rewild vulnerable, foundational coral species. Stony corals are now propagated by thousands in both in-water and ex situ (land-based) coral nurseries, the latter being unexplored in Costa Rica, despite their potential benefits as a reef management tool. Objective: To analyze the viability of ex situ culturing of the Pacific reef-building corals Porites lobata and Pocillopora damicornis at Parque Marino del Pacífico (PMP), Puntarenas, Costa Rica, aquaculture facilities. Methods: From May to October 2018 a total of 180 coral fragments were kept in an aquaculture recirculated system. Survival, growth, and fragment yield in relation to culture medium (physicochemical parameters) were recorded. Results: Survival and growth rate varied between species and culture tanks. On average, surviving P. lobata fragments (68.89 %) placed in Tank 1 (T1) grew 216 %, while fragments placed in Tank 2 (T2) had a survival rate of 71.11 % and an increase of 277 % in live tissue area. P. damicornis fragments survival, basal and crown area percentage increase were: 71.11 %, 980 % and 366 % in T1, and 100 %, 976 % and 287 % in T2. Although fragments survival and growth were net positive, the yield in terms of culture was low, due to culture conditions in the tanks not meeting coral culture optimal requirements. Conclusions: Survival and growth of both species varied depending on the tank in which they were placed. Survival was similar to that found in other ex situ studies and growth was similar to those reported in the wild, however culture performance in terms of yield was low. Aquaculture systems at PMP constitute a good base for the cultivation of corals, however for the culture effort to achieve maximum yield, current systems must be optimized according to the requirements of the target coral species.

Introducción: El declive mundial de los arrecifes de coral, ha impulsado a la restauración coralina como una estrategia viable para recuperar especies de coral fundacionales, en estado vulnerable. Los corales pétreos se propagan por miles, tanto en viveros subacuáticos como ex situ (en tierra). Siendo el segundo método poco explorado en Costa Rica, a pesar de sus potenciales beneficios como medida como herramienta de manejo arrecifal. Objetivo: Analizar la viabilidad del cultivo ex situ de las especies de coral constructoras de arrecifes Porites lobata y Pocillopora damicornis en el módulo de acuicultura del Parque Marino del Pacífico (PMP), Puntarenas, Costa Rica. Métodos: Desde el 17 de mayo hasta el 17 de octubre de 2018, se mantuvieron un total de 180 fragmentos de coral en un sistema de recirculación de acuicultura. Se registraron la supervivencia, el crecimiento y el rendimiento de los fragmentos en relación con el medio de cultivo (parámetros fisicoquímicos). Resultados: La tasa de supervivencia y crecimiento varió entre especies y tanques de cultivo. En promedio, los fragmentos de P. lobata supervivientes (68.89 %) colocados en el tanque 1 (T1) crecieron un 216 %. En contraste con los fragmentos colocados en el tanque 2 (T2) que mostraron una tasa de supervivencia del 71.11 % y un aumento del 277 % en el área de tejido vivo. En el caso de P. damicornis, los porcentajes de supervivencia, de aumento del área basal y del área de la corona fueron: 71.11 %, 980 %, y 366 %, y 100 %, 976 %, y 287 % para los fragmentos colocados en T1 y T2, respectivamente. Aunque la supervivencia y el crecimiento de los fragmentos fueron positivos, el rendimiento en términos de cultivo fue bajo, debido a que las condiciones en los tanques no cumplían con las condiciones ideales para el cultivo de corales. Conclusiones: La supervivencia y el crecimiento de ambas especies variaron en función del tanque en el que se colocaron. La supervivencia fue similar a la observada en otros estudios ex situ y el crecimiento fue similar al reportado en la naturaleza, pero el rendimiento del cultivo fue bajo. Los sistemas de acuicultura del PMP constituyen una buena base para el cultivo de corales, sin embargo, para que el esfuerzo de cultivo alcance un máximo de rendimiento, los sistemas actuales deben optimizarse en función de los requisitos de las especies de coral objetivo.

Control de la calidad y ensayos de rendimiento de CromoCen® SALM según la norma ISO 11133:2014/Amd. 1: 2018 / Quality control and performance testing of CromoCen® SALM according to ISO 11133: 2014 / Amd.1: 2018

Introducción: En Cuba, se desarrolló un medio de cultivo cromogénico y fluorogénico, para la detección, aislamiento y diferenciación de Salmonella de otras bacterias Gram negativas. El método que emplea el medio fue validado y su uso se adoptó en una norma cubana. El aseguramiento de la calidad y el control del rendimiento de los medios garantizan la confiabilidad de los resultados analíticos. La norma ISO 11133 establece criterios mínimos y métodos para evaluarlos. Objetivo: Evaluar los criterios de control de la calidad y de rendimiento de CromoCen® SALM, establecidos en la ISO 11133:2014/Amd.1:2018, para demostrar su fiabilidad para el análisis microbiológico de los alimentos de consumo humano. Métodos: Se evaluaron los indicadores de calidad físico-químicos de tres lotes y se definió un conjunto de ellos que caracteriza la calidad del medio antes y después de terminado, así como la consistencia entre lotes. Para el ensayo de rendimiento se seleccionaron 10 cepas de diferentes géneros. Se determinó la relación de productividad, el factor de selectividad y la electividad de CromoCen® SALM, según la ISO 11133. Resultados: La evaluación físico-química mostró una consistencia entre lotes en color, homogeneidad, apariencia del polvo y del medio preparado. Los valores de contenido de humedad y pH se encontraron dentro de los valores establecidos para este producto. La relación de productividad de CromoCen® SALM con respecto al agar triptona soya, fue superior al 50 por ciento, mientras que el factor de selectividad resultó de 4. Se demostró que en el medio de cultivo se puede diferenciar un grupo representativo de géneros microbianos de Salmonella. Conclusiones: CromoCen® SALM cumple con los requisitos de calidad establecidos para este tipo de productos, según la ISO 11133 vigente. La correcta formulación de los lotes, así como el cumplimiento de los requisitos de calidad aseguran el funcionamiento adecuado para lo que fue diseñado(AU)

Introduction: In Cuba, a new chromogenic and fluorogenic culture medium was developed for the detection, isolation and differentiation of Salmonella from other Gram negative bacteria. The method and medium were validated and their use was adopted as a Cuban standard. Quality assurance and control of media is essential and mandatory to ensure the reliability of the results of the analysis in which they are used. ISO 11133 establishes minimum criteria and methods to evaluate them. Objective: To evaluate the quality and performance criteria of CromoCen® SALM, as recommended in ISO 11133:2014/Amd.1:2018 to demonstrate its reliability for the microbiological analysis of food for human consumption. Methods: The physical-chemical quality indicators of three batches were evaluated and a group of them was defined to characterize its quality before and after finishing, as well to evaluate the consistency between batches. For the performance test, 12 strains of different genera were selected. The productivity ratio, the selectivity factor and the electivity of CromoCen® SALM were determined. Results: The physico-chemical evaluation showed a consistency between batches in color, homogeneity, appearance of the powder and of the prepared medium. The moisture content and pH values ranged within the established values for this product. The productivity ratio of CromoCen® SALM with respect to tryptone soy agar was greater than 50 percent, while the selectivity factor was 4. It was shown that in the culture medium a representative group of Salmonella microbial genera can be differentiated. Conclusions: CromoCen® SALM meets the quality requirements established for this type of products, according to the current ISO 11133 standard. The correct formulation of the batches, as well as the fulfillment of the quality requirements ensure the proper functionality and match the design purpose(AU)

Bloodstream infections and antibiotic resistance at a regional hospital, Colombia, 2019-2021 / Infecciones del torrente sanguíneo y resistencia a los antibióticos en un hospital regional en Colombia, 2019-2021 / Infecções de corrente sanguínea e resistência a antibióticos em um hospital regional, Colômbia, 2019-2021

ABSTRACT Objectives. To assess antibiotic susceptibility of World Health Organization (WHO) priority bacteria (Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, and Streptococcus pneumoniae) in blood cultures at the Orinoquía regional hospital in Colombia. Methods. This was cross-sectional study using routine laboratory data for the period 2019-2021. Data on blood samples from patients suspected of a bloodstream infection were examined. We determined: the total number of blood cultures done and the proportion with culture yield; the characteristics of patients with priority bacteria; and the type of bacteria isolated and antibiotic resistance patterns. Results. Of 25 469 blood cultures done, 1628 (6%) yielded bacteria; 774 (48%) of these bacteria were WHO priority pathogens. Most of the priority bacteria isolated (558; 72%) were gram-negative and 216 (28%) were gram-positive organisms. Most patients with priority bacteria (666; 86%) were hospitalized in wards other than the intensive care unit, 427 (55%) were male, and 321 (42%) were ≥ 60 years of age. Of the 216 gram-positive bacteria isolated, 205 (95%) were Staphylococcus aureus. Of the 558 gram-negative priority bacteria isolated, the three most common were Escherichia coli (34%), Klebsiella pneumoniae (28%), and Acinetobacter baumannii (20%). The highest resistance of Staphylococcus aureus was to oxacillin (41%). For gram-negative bacteria, resistance to antibiotics ranged from 4% (amikacin) to 72% (ampicillin). Conclusions. Bacterial yield from blood cultures was low and could be improved. WHO priority bacteria were found in all hospital wards. This calls for rigorous infection prevention and control standards and continued surveillance of antibiotic resistance.

RESUMEN Objetivos. Evaluar la sensibilidad a los antibióticos de las bacterias incluidas en la lista prioritaria de la Organización Mundial de la Salud (OMS) (Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella spp., Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae) en hemocultivos en el Hospital Regional de la Orinoquía en Colombia. Métodos. Se trata de un estudio transversal que empleó datos rutinarios de laboratorio del período comprendido entre los años 2019 y 2021. Se examinaron datos de muestras de sangre de pacientes con presunción clínica de infección del torrente sanguíneo. Se determinó el número total de hemocultivos realizados y la proporción cultivos con resultados, las características de los pacientes con bacterias prioritarias, así como el tipo de bacterias aisladas y los patrones de resistencia a los antibióticos. Resultados. De 25 469 hemocultivos realizados, se aislaron bacterias en 1628 (6%); 774 (48%) con agentes patógenos prioritarios de la OMS. La mayoría de las cepas bacterianas prioritarias aisladas (558; 72%) eran gramnegativas y 216 (28%), organismos grampositivos. La mayoría de los pacientes con bacterias prioritarias (666; 86%) fueron hospitalizados en salas distintas de la unidad de cuidados intensivos, 427 (55%) eran varones y 321 (42%) tenían 60 años o más. De las 216 bacterias grampositivas aisladas, 205 (95%) eran Staphylococcus aureus. De las 558 bacterias prioritarias gramnegativas aisladas, las tres más comunes fueron Escherichia coli (34%), Klebsiella pneumoniae (28%) y Acinetobacter baumannii (20%). La mayor resistencia de Staphylococcus aureus fue a la oxacilina (41%). Entre las bacterias gramnegativas, la resistencia a los antibióticos varió del 4% (amikacina) al 72% (ampicilina). Conclusiones. El aislamiento de bacterias en los hemocultivos fue bajo y podría mejorarse. Se encontraron bacterias de la lista prioritaria de la OMS en todas las salas del hospital, por lo que es necesario aplicar rigurosas normas de prevención y control de infecciones y realizar una vigilancia continua de la resistencia a los antibióticos.

RESUMO Objetivos. Avaliar a suscetibilidade a antibióticos das bactérias consideradas prioritárias pela Organização Mundial da Saúde (OMS) (Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella spp., Staphylococcus aureus e Streptococcus pneumoniae) em hemoculturas coletadas no hospital regional de Orinoquía na Colômbia. Métodos. Estudo transversal utilizando dados laboratoriais de rotina do período 2019-2021. Foram examinados os dados de amostras de sangue de pacientes com suspeita de infecção de corrente sanguínea. Determinamos o número total de hemoculturas realizadas e a proporção de culturas com rendimento, as características dos pacientes com bactérias prioritárias, e o tipo de bactéria isolada e padrões de resistência a antibióticos. Resultados. Das 25.469 hemoculturas realizadas, 1.628 (6%) foram positivas para bactérias, sendo que 774 (48%) dessas bactérias eram da lista de agentes patogênicos prioritários da OMS. A maioria das bactérias prioritárias isoladas (558; 72%) eram gram-negativas e 216 (28%) eram gram-positivas. A maioria dos pacientes com bactérias prioritárias (666; 86%) estava internada em enfermaria, e não em unidade de terapia intensiva. 427 (55%) eram homens e 321 (42%) tinham ≥ 60 anos de idade. Das 216 bactérias gram-positivas isoladas, 205 (95%) eram Staphylococcus aureus. Das 558 bactérias gram-negativas prioritárias isoladas, as três mais frequentes foram Escherichia coli (34%), Klebsiella pneumoniae (28%) e Acinetobacter baumannii (20%). O Staphylococcus aureus apresentou maior resistência à oxacilina (41%). Entre as bactérias gram-negativas, a resistência aos antibióticos variou entre 4% (amicacina) e 72% (ampicilina). Conclusões. O rendimento bacteriano das hemoculturas foi baixo e pode ser melhorado. As bactérias consideradas prioritárias pela OMS foram encontradas em todas as enfermarias do hospital. Os achados exigem normas rigorosas de prevenção e controle de infecção, e vigilância contínua da resistência bacteriana a antibióticos.

Minador en albahaca Ocimum basilicum L. y su parasitoide

La albahaca es una planta de distribución mundial, de uso cotidiano en la preparación de comidas. En Venezuela, aspectos sobre insectos plagas de la albahaca y de sus controladores naturales, son desconocidos. El presente trabajo ofrece información sobre una mosca minadora y un parasitoide que se encontraron en muestras de plantas, con signos de daños foliares, provenientes de huertos familiares, aledaños al Parque Nacional Henri Pittier, de los municipios Girardot e Iragorry, las cuales, fueron colocadas en cámaras de cría, para la emergencia de los adultos; una vez que emergieron fueron capturados y debidamente montados para su identificación. Como resultado, se capturaron adultos de un díptero y una avispa parasitoide, que fueron identificados como Calycomyza hyptidis y Opius sp. Este parasitoide constituye el primer registro de asociación parasítica sobre C. hyptidis en albahaca. Todos los adultos fueron depositados en el Museo de Insectos de Interés Agrícola (MIIA).

Basil is a plant with worldwide distribution, used daily in the preparation of meals. In Venezuela, aspects of basil pesto insects and their natural controllers are unknown. The present work offers information on a leafminer fly and a parasitoid that were found in samples of plants with signs of foliar damage, coming from family orchards near the Henri Pittier National Park, from the Girardot and Iragorry municipalities of Aragua state, which were placed in breeding chambers for the emergence of adults, once they emerged they were captured and properly mounted for identification. As a result, adults of a diptera and a parasitoid wasp were identified as Calycomyza hyptidis and Opius sp. This parasitoid constitutes the first record of a parasitic association on C. hyptidis on basil. All the adults were deposited in the Museum of Insects of Agricultural Interest (MIIA).

Efecto de la intensidad de las unidades de fotopolimerización sobre la biocompatibilidad y resistencia a la flexión de una resina compuesta

Objetivo: Determinar el efecto de la intensidad de dos unidades de fotopolimerización sobre la biocompatibilidad, resistencia flexural y módulo elástico de una resina compuesta. Metodología: Se crearon dos grupos de resina compuesta Filtek Z250XT cada uno fotopolimerizado con intensidades diferentes (800 mW/cm2 por 20s). La viabilidad celular fue analizada mediante ensayo de MTT a las 24 y 48 horas siguiendo la normativa ISO 10993-5. La resistencia flexural y módulo elástico fueron analizadas siguiendo la normativa ISO 4049. Resultados: En el grupo fotopolimerizado con una intensidad <400 mW/cm2, la citotoxicidad fue estadísticamente mayor tanto a las 24 como a las 48 horas y la resistencia flexural y módulo elástico fueron estadísticamente menores Conclusión: Una intensidad de polimerización <400 mW/cm2, aumenta los niveles de citotoxicidad y disminuye las propiedades mecánicas de las resinas compuestas. Se destaca la importancia del control periódico de las unidades de fotopolimerización.

Objetivo: Determinar o efeito da intensidade de duas unidades de fotopolimerização na biocompatibilidade, resistência à flexão e módulo de elasticidade de uma resina composta. Metodologia: Foram fabricados dois grupos de resina composta Filtek Z250XT, cada um deles foi fotopolimerizado com intensidades diferentes ( 800 mW/cm2 por 20s). A viabilidade celular foi analisada por ensaio de MTT em 24 e 48 horas seguindo a norma ISO 10993-5. A resistência à flexão e o módulo de elasticidade foram analisados ​​seguindo a norma ISO 4049. Resultados: No grupo fotopolimerizado com intensidade <400mW/cm2, a citotoxicidade foi estatisticamente maior nas 24 e 48 horas e a resistência à flexão e o módulo de elasticidade foram estatisticamente menores. Conclusão: Uma intensidade de polimerização <400 mW/cm2 aumenta os níveis de citotoxicidade e diminui as propriedades mecânicas das resinas compostas. Destaca-se a importância do controle periódico das unidades de fotopolimerização.

Objective: To determine the effect of the intensity of two light curing units on the biocompatibility, flexural strength and elastic modulus of a composite resin. Methodology: Two groups of Filtek Z250XT (3M ESPE) composite resin were created, each one photopolymerized using different intensities ( 800 mW/cm2 for 20s). Cell viability was analyzed by MTT assay at 24 and 48 hours following the ISO 10993-5 standard. The flexural strength and elastic modulus were analyzed following the ISO 4049 standard. Results: In the group photopolymerized with an intensity <400 mW/cm2, cytotoxicity was statistically higher both at 24 and 48 hours and flexural strength and elastic modulus were statistically lower. Conclusion: A polymerization intensity <400 mW/cm2 increases the levels of cytotoxicity and decreases the mechanical properties of composite resins. The importance of the periodic control of the light curing units is emphasized.

Estudio de la calidad del agua en estanques e implementación de un protocolo de buenas prácticas acuícolas en la producción de camarón marino en Camaronera Eben Ezer, San Alejo, La Unión / Study of water quality in ponds and implementation of a Good Aquaculture Practices Protocol in the production of marine shrimp at the Camaronera Eben-Ezer, San Alejo, La Unión

La Escuela Especializada en Ingeniería ITCA FEPADE, MEGATEC La Unión, a través de la carrera Técnico en Manejo Integrado de Recursos Costero Marino con especialidad en Acuicultura y Pesquería, realizó esta investigación en asocio con Camaronera Eben Ezer. El proyecto tuvo como objetivo la caracterización de la calidad física, química y biológica del agua del Golfo de Fonseca y el Estero El Chapernal, previo al desarrollo de dos ciclos de cultivo de camarón marino Litopenaeus vannamei, durante el cultivo y antes de las descargas de agua a los efluentes receptores. La metodología se desarrolló en tres fases, de junio a diciembre de 2021. Fase de campo: toma de parámetros físicos, químicos y biológicos en 8 puntos de muestreos, Estero El Chapernal, Golfo de Fonseca y estanques de producción. Fase de laboratorio: se realizó sembrando muestras de agua en medios de cultivo para aislamiento, crecimiento e identificación de bacterias. Tercera fase: procesamiento de datos y análisis de resultados. Se identificaron tres tipos de bacterias: Psudomonas, Vibrios y Heterótrofas. En el primer ciclo de junio a agosto, éstas no reportaron crecimiento, esto pudo deberse a que la transición de la época seca a época lluviosa influyó en los factores físicos y químicos, como la temperatura y el pH. Durante el primer ciclo, la calidad del agua del Estero El Chapernal mantuvo estándares idóneos para el crecimiento del camarón. El segundo ciclo presentó un crecimiento exponencial de las bacterias Heterótrofas y Pseudomonas sobrepasando los límites de referencia establecidos en la normativa vigente. Como parte de la proyección social se efectuó transferencia de conocimientos y tecnología durante la producción, se establecieron mejoras para la operatividad y se les dotó de un protocolo de producción acuícola.

The Escuela Especializada en Ingeniería ITCA FEPADE, MEGATEC La Unión, through the major of Técnico en Manejo Integrado de Recursos Costero Marino con especialidad en Acuicultura y Pesquería, carried out this research in association with Camaronera Eben Ezer. The objective of the project was to characterize the physical, chemical and biological quality of water in Golfo de Fonseca and Estero El Chapernal, prior to the development of two culture cycles of the marine shrimp Litopenaeus vannamei, during the culture and before discharges of water to receiving effluents. The methodology was developed in three phases, from June to December 2021. Field phase: collection of physical, chemical and biological parameters at 8 demonstration points, Estero El Chapernal, Golfo de Fonseca and production ponds. Laboratory phase: it was carried out by planting water samples in culture media for isolation, growth and identification of bacteria. Third phase: data processing and analysis of results. Three types of bacteria were identified: Psudomonas, Vibrios and Heterotrophs. In the first cycle from June to August, growth was not reported, due to the fact that the transition from the dry season to the rainy season influenced in physical and chemical factors, such as temperature and pH. During the first cycle, the water quality of Estero El Chapernal maintained optimal standards for shrimp growth. The second cycle presented an exponential growth of Heterotrophic and Pseudomonas bacteria, exceeding the reference limits established in current regulations. As part of the social projection, knowledge and technology were transferred during production, they were profoundly improved for operability and they were provided with an aquaculture production protocol.

Extended-spectrum and AmpC ß-lactamases screening and antibiotic resistance profile of Escherichia coli isolated from urine / Análisis de las ß-lactamasas de espectro extendido y tipo AmpC y el perfil de resistencia a antibióticos de Escherichia coli aisladas de orina

Introduction: Antimicrobial resistance is a global concern since infections by resistant pathogens are associated with higher mortality and morbidity. Objective: To assess the prevalence of Escherichia coli isolates producing extended-spectrum and AmpC beta-lactamase (ESBL) in urine samples from patients at the Hospital Metropolitano de Santiago in Dominican Republic. Methods: Pathogen identification and antibiogram were carried out by the automated systems BD Phoenix or Microscan®. General information and past medical history were gathered from patients with a positive urine culture for E. coli. Manual ESBL/AmpC screening was performed with the commercial ESBL+AmpC screen disc kit from Liofilchem Laboratory, Italy. Results: One or both of the studied phenotypes were present in 36% of the analyzed isolates. Among the risk factors for the detection of E. coli producing ESBL and/or AmpC in urine were male gender, advanced age, placement of urinary catheter, arterial hypertension, neoplasms, and coexistence of two or more comorbidities. Apart from cephalosporins resistance, isolates producing ESBL and/or AmpC also showed higher resistance to other antibiotics, such as gentamicin (66.7%), ciprofloxacin and levofloxacin (83.3%), and ampicillin (91.7%). Furthermore, 85% of the ESBL/AmpC producing samples were multidrug resistant (resistant to 1 or more drugs in at least 3 different antibiotic categories). Conclusions: The high prevalence of antimicrobial resistance found in this study highlights the importance of implementing national and global measures to tackle the problem, especially in developing countries such as the Dominican Republic, where resources are scarce.

Introducción: La resistencia antimicrobiana es un grave problema global, pues las infecciones causadas por patógenos resistentes están asociadas con una mayor mortalidad y morbilidad. Objetivos: Analizar la prevalencia de aislados de Escherichia coli productores de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) y tipo AmpC procedentes de muestras de orina de pacientes del Hospital Metropolitano de Santiago en la República Dominicana. Métodos: La identificación del patógeno y el antibiograma fueron llevados a cabo mediante los sistemas automáticos BD Phoenix o Microscan®. Se recolectó información general y la historia médica de pacientes con un cultivo de orina positivo para E. coli. La detección de BLEE/AmpC se realizó de manera manual con el estuche comercial ESBL+AmpC de Liofilchem Laboratory, de Italia. Resultados: Un 36 % de las muestras analizadas mostraron uno o ambos fenotipos estudiados. Como factores de riesgo para la detección en orina de E. coli productoras de BLEE o AmpC se encontraron: sexo masculino, edad avanzada, colocación de un catéter urinario, hipertensión, neoplasmas y coexistencia de comorbilidades. Además de resistencia a las cefalosporinas, los aislados productores de BLEE y AmpC revelaron también elevada resistencia a otros antibióticos como gentamicina (66,7 %), ciprofloxacina y levofloxacina (83,3 %), y ampicilina (91,7 %). Un 85,0 % de las muestras productoras de BLEE/AmpC fueron multidrogorresistentes. Conclusiones: La elevada prevalencia de resistencia antimicrobiana encontrada en este estudio refleja la importancia de tomar medidas nacionales y globales para contener el problema, especialmente en países en desarrollo como República Dominicana, donde los recursos son escasos.

In vitro propagation of a cuban Arbuscular Mycorrhizal Fungal strain and factible bacteria's association / Propagación in vitro de una cepa cubana de Hongos Micorrízicos Arbusculares y su factible asociación a bacterias

ABSTRACT In vitro root cultivation techniques based on modified root systems are often used in studies on Arbuscular Mycorrhizal Fungi (AMF). It is a simplified but powerful tool to investigate AMF root colonization and development of the extraradical mycelium. The aim of this study was to establish and characterize the in vitro culture of a Cuban strain of Rhizophagus irregularis (INCAM 11) by using transformed chicory roots. For that, superficially disinfected propagules of R. irregularis were co-culture with the hairy transformed chicory roots on Modified Strullu and Romand (MSR) medium during five months. Spore germination was observed 3-5 days after surface disinfection. The first contact between AMF hyphae and roots occurred 1 - 3 days after germination and a significant production of extensive extraradical mycelium was observed. New spore formation started within 21 - 25 days. After 5 months, 2000 spores could be observed per plate which were able to germinate, colonize, establish and reproduce again spores when associated to young transformed roots of chicory. The most frequent associated microorganism to the in vitro culture of INCAM 11 was isolated and identified as Paenibacillus sp.

RESUMEN Las técnicas de cultivo de raíces in vitro basadas en sistemas de raíces modificadas se utilizan a menudo en los estudios sobre hongos micorrízicos arbusculares (HMA). Es una herramienta simplificada pero poderosa para investigar la colonización de las raíces de los HMA y el desarrollo del micelio extrarradical. El objetivo de este estudio fue establecer y caracterizar el cultivo in vitro de una cepa cubana de Rhizophagus irregularis (INCAM 11) utilizando raíces transformadas de achicoria. Para ello, propágulos de R. irregularis desinfectados superficialmente fueron co-cultivados con las raíces transformadas de achicoria en medio Strullu y Romand modificado (SRM) durante cinco meses. La germinación de las esporas se observó 3-5 días después de la desinfección superficial. El primer contacto entre las hifas y las raíces se produjo entre 1 y 3 días después de la germinación y se observó una producción significativa de micelio extrarradical. La formación de nuevas esporas comenzó entre 21 - 25 días. Después de 5 meses, se pudieron observar 2000 esporas por placa que fueron capaces de germinar, colonizar, establecer y reproducir nuevas esporas cuando se asociaron a raíces jóvenes transformadas de achicoria. El microorganismo asociado frecuentemente al cultivo in vitro de INCAM 11 fue aislado e identificado como Paenibacillus sp.

Lack of evidence for Mycoplasma spp. in bulk tank milk of herds located in mid-western Colombia / Falta de evidencia para Mycoplasma spp. en leche de tanques de enfriamiento de hatos del centro-occidente colombiano

ABSTRACT Mycoplasma spp. is reported as a highly contagious mastitis-causing bacteria in dairy cattle, without successful or low response to most common antibiotic treatments due to the lack of cell wall. In Colombia it has been reported in the Central Andean region during 2014. The aim was to estimate the prevalence of Mycoplasma spp. in bulk tank milk using microbiological and molecular diagnosis. A random longitudinal study enrolling 220 commercial dairy farms located in four provinces of the mid-western region of Colombia from four pasteurizer companies was performed. Bulk tank milk samples were collected once monthly for three months period for determining somatic cell count (SCC) and microbiological and molecular diagnosis of Mycoplasma spp. cultures were done without pre-enrichment procedures directly in mycoplasma agar with cefoperazone to inhibit growth of opportunistic microorganisms, plates were incubated under 37° C and atmosphere of 10% CO2 and inspected during a 10d period. Molecular analysis was done by a multiplex PCR using specific primers targeting the 16S-23S rARN gene of Mycoplasma spp. and from non-pathogenic bacteria occasionally found in milk. LnSCC average of included dairy farms was 6.19 x103 cells/mL, Mycoplasma spp. was not isolated during microbiological cultures, and no DNA belonging to the species was detected by PCR in the 220 bulk tanks milk, with an estimated prevalence lower than 2.3%. This finding shows that there is not microbiological or molecular evidence that demonstrates the presence of the pathogen in the milk from the mid-western region of Colombia at herd level.

RESUMEN Mycoplasma spp. está descrito como una bacteria causante de mastitis altamente contagiosa en ganado lechero, sin o con baja respuesta a tratamientos antibióticos convencionales debido a que carece de pared celular. En Colombia ha sido reportado en la región Andina Central durante 2014. El objetivo fue estimar la prevalencia de Mycoplasma spp. en leche de tanques de enfriamiento empleando diagnósticos microbiológicos y moleculares. Se realizó un estudio aleatorio longitudinal que incluyó 220 lecherías comerciales en cuatro departamentos del centro-occidente colombiano acopiadas por cuatro compañías pasteurizadoras. Se recolectaron muestras de leche del tanque de enfriamiento mensualmente durante tres meses para determinar el recuento de células somáticas (SCC) y el diagnóstico microbiològico y molecular de Mycoplasma spp. Los cultivos se realizaron sin procedimientos de preenriquecimiento directamente en agar micoplasma con cefoperazona para inhibir crecimiento de microorganismos oportunistas, los agares se incubaron a 37° C con una atmosfera del 10% CO2 e inspeccionados durante 10d. Los análisis moleculares se realizaron por PCR multiplex usando cebadores específicos para los genes 16S-23S rRNA del Mycoplasma spp. y de algunas bacterias oportunistas ocasionales en la leche. El promedio del LnSCC fue de 6.19 x103 células/ mL, Mycoplasma spp. no fue aislado de los cultivos microbiológicos y no se encontró ADN de a esta especie mediante PCR en los 220 tanques de leche. Lo anterior indica una prevalencia estimada menor a 2,3%. Se concluye que no existe evidencia micro-biológica ni molecular para demostrar la presencia del patógeno en la leche de la región centro-occidente colombiana a nivel de hato.

Manipulação de oócitos inclusos em folículos ovarianos pré-antrais e a importância dos antioxidantes ­ revisão de literatura / Manipulation of oocytes included in preantral ovarian follicles and the importance of antioxidants ­ literature review / Manipulación de ovocitos incluidos en folículos ováricos preantrales e importancia de los antioxidantes - revisión de la literatura

A manipulação de oócitos inclusos em folículos ovarianos pré-antrais (MOIFOPA) vem sendo estudada pensando na perspectiva futura de aplicação direta na reprodução humana, principalmente para mulheres que sofrem de doenças ou que precisam passar por tratamentos que interferem na função ovariana. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho é revisar aspectos relacionados com a biotécnica de MOIFOPA e a importância dos antioxidantes no cultivo in vitro de folículos pré-antrais. Foi realizada uma pesquisa na base de dados PubMed, buscando artigos sobre a biotécnica, principalmente relacionados com a necessidade do uso de antioxidantes no cultivo. A grande maioria dos estudos sobre a biotécnica utilizam como modelo experimental os folículos ovarianos de diferentes espécies de animais. A MOIFOPA compreende o isolamento e o resgate de folículos ovarianos pré-antrais provenientes de ovários, seguido da conservação através da técnica de resfriamento ou congelação e o cultivo folicular in vitro, a fim de promover o crescimento, a maturação e a fecundação in vitro (FIV) dos oócitos inclusos nesses folículos, maximizando o potencial reprodutivo feminino e diminuindo a atresia folicular que acontece in vivo. Um aspecto que pode interferir no sucesso do cultivo in vitro de folículos ovarianos pré-antrais é a produção em excesso de espécies reativas de oxigênio (EROs). Os ácidos ascórbico e alfa lipóico vem demonstrando resultados interessantes para reduzir os efeitos que as EROs causam sobre os folículos ovarianos pré-antrais cultivados in vitro.

The manipulation of oocytes included in preantral ovarian follicles (MOEPF) has been studied considering the future perspective of direct application in human reproduction, especially for women who suffer from diseases or who need to undergo treatments that interfere with ovarian function. In this context, the objective of this paper is to review aspects related to the biotechnology of MOIFOPA and the importance of antioxidants. A search was carried out in the PubMed database, searching for articles on biotechnology, mainly related to the need to use antioxidants in cultivation. The vast majority of studies on biotechnology use ovarian follicles from different species of animals as an experimental model. MOIFOPA comprises the isolation and rescue of preantral ovarian follicles from ovaries, followed by conservation through the cooling or freezing technique and in vitro follicular cultivation, in order to promote growth, maturation and in vitro fertilization ( IVF) of the oocytes included in these follicles, maximizing the female reproductive potential and decreasing the follicular atresia that occurs in vivo. One aspect that may interfere with the success of in vitro culture of preantral ovarian follicles is the excess production of reactive oxygen species (ROS). Ascorbic and alpha lipoic acids have shown interesting results in reducing the effects that ROS cause on in vitro cultured preantral ovarian follicles.

manipulación de ovocitos incluidos en folículos ováricos preantrales (MOIFOPA) se ha estudiado con la perspectiva futura de su aplicación directa en la reproducción humana, especialmente en mujeres que padecen enfermedades o que necesitan someterse a tratamientos que interfieren en la función ovárica. En este contexto, el objetivo de este trabajo es revisar los aspectos relacionados con la biotécnica de MOIFOPA y la importancia de los antioxidantes en el cultivo in vitro de los folículos pré-antrais. Se realizó una investigación en la base de datos PubMed, buscando artículos sobre la biotecnología, principalmente relacionados con la necesidad del uso de antioxidantes en el cultivo. La mayoría de los estudios sobre biotecnología utilizan como modelo experimental los folículos ováricos de diferentes especies de animales. El MOIFOPA incluye el aislamiento y rescate de los folículos ováricos preantrales de los ovarios, seguido de su conservación mediante la técnica de enfriamiento o congelación y el cultivo folicular in vitro, con el fin de promover el crecimiento, la maduración y la fecundación in vitro (FIV) de los ovocitos incluidos en estos folículos, maximizando el potencial reproductivo femenino y disminuyendo la atresia folicular que se produce in vivo. Un aspecto que puede interferir en el éxito del cultivo in vitro de folículos ováricos preantrales es la producción excesiva de especies reactivas de oxígeno (ROS). El ácido ascórbico y el ácido alfa lipoico han mostrado resultados interesantes para reducir los efectos que causan las ERO en los folículos ováricos preantrales cultivados in vitro.

El dilema en los laboratorios de Koch, ¿Cultivar o no Cultivar? / The Dilemma in Koch's Laboratories, To Cultivate or Not to Cultivate?

La nueva norma técnica para el control y la eliminación de la tuberculosis es un gran avance para el diagnóstico de este microorganismo en Chile. Actualmente la principal técnica microbiológica para el diagnóstico de laboratorio es la biología molecular, que reduce el tiempo del resultado a tan solo un par de horas. La normativa actual indica que en el paciente caso presuntivo de tuberculosis (CPT) la técnica exclusiva a realizar es Biología molecular. La literatura indica que la detección a través de amplificación de material genético de la micobacteria tiene un límite de detección de 15,6 UFC/ ml, por tanto, todas las muestras bajo ese límite umbral potencialmente podrían no ser diagnosticadas bajo esta estructura emanada por el ministerio de Salud en Chile. Nuestra recomendación es continuar con el estudio de cultivo en medios líquidos o sólidos para todas las muestras hasta obtener literatura que avale lo contrario

The new technical standard for the control and elimination of tuberculosis in Chile is a great advance for the diagnosis of this microorganism. Currently the main microbiological technique for laboratory diagnosis is PCR, which reduces the time to result to just a couple of hours. The current regulations indicate that in the patient with a presumptive case of tuberculosis (CPT) t he exclusive technique to be performed is PCR. The literature indicates that the detection through amplification of genetic material of the mycobacterium has a detection limit of 15.6 CFU/ml, therefore, all samples under this threshold limit could potentially not be diagnosed under this structure emanated by the Ministry of Health in Chile. Our recommendation is to continue with the study of culture in liquid or solid media for all samples until literature confirms otherwise

Dinámica de la evolución de las formas de Blastocystis spp. en un medio de cultivo simple / Dynamics of the evolution of the forms of Blastocystis spp. in a simple culture medium

Resumen Blastocystis spp. es un parásito muy frecuente en materia fecal humana, pero la naturaleza polimórfica y el número de Blastocystis en la muestra pueden complicar su detección por microscopía. El objetivo del trabajo fue describir la dinámica de los morfotipos de Blastocystis a corto plazo en un medio de cultivo simple y determinar su aplicabilidad para utilizarlo como complemento del análisis coproparasitológico y para estudios morfológicos, bioquímicos y moleculares del parásito. Se sembraron 10 muestras de materia fecal con Blastocystis en un medio Pavlova adaptado, se examinaron diariamente por examen microscópico durante 6 días y se registraron las formas y el recuento. El desarrollo fue regular y abundante y las formas fueron de tamaños variables y claramente identificables. El cultivo ensayado puede ser útil para la detección de Blastocystis cuando existan dudas diagnósticas por microscopía, para estudios de sensibilidad y especificidad diagnóstica o cuando se requiera aumentar la carga para realizar otros estudios.

Abstract Blastocystis spp. is a very frequent parasite in human fecal matter, but the polymorphic nature and the number of Blastocystis in a sample can complicate its detection by microscopy. The objective of the present work was to describe the dynamics of Blastocystis morphotypes in the short term in a simple culture medium and to determine its applicability to use it as a complement to coproparasitological analysis and for morphological, biochemical and molecular studies of the parasite. Ten stool samples with Blastocystis were cultured in an adapted Pavlova medium and examined during 6 days by microscopy to record the forms and the count. The development was regular and abundant and the shapes were of variable sizes and clearly identifiable. The tested culture could be used for the detection of Blastocystis when microscopic diagnosis is dubious, for studies of diagnostic sensitivity and specificity or when it is necessary to increase the load to perform other studies.

Resumo Blastocystis spp. é um parasita muito frequente nas fezes humanas, mas a natureza polimórfica e o número de Blastocystis na amostra podem complicar a sua detecção através do microscópio. O objetivo do trabalho foi descrever a dinâmica dos morfotipos de Blastocystis no curto prazo em um meio de cultura simples e determinar sua aplicabilidade para ser utilizado como complemento da análise coproparasitológica e para estudos morfológicos, bioquímicos e moleculares do parasita. Foram semeadas dez amostras de fezes com Blastocystis em um meio Pavlova adaptado e examinadas diariamente através de exame microscópico durante 6 dias, registrando as formas e fazendo recontagem. O desenvolvimento foi regular e abundante e as formas foram de tamanhos variáveis e claramente identificáveis. A cultura testada pode ser útil para a detecção de Blastocystis quando houver dúvidas diagnósticas por microscopia; para estudos de sensibilidade e especificidade diagnóstica ou quando for necessário aumentar a carga para a realização de outros estudos.

Evaluation of antioxidant activity, phenolic content, anthocyanins, and flavonoids of fresh and dried 'Biloxi' blueberries / Evaluación de la actividad antioxidante, contenido fenólico, antocianinas y flavonoides de arándanos 'Biloxi' frescos y secos

BACKGROUND: The phytochemical content present in blueberries has generated great interest, especially in the nutra-pharmaceutical industry, where it is known as the "super fruit" due to its prevention and treatment of neurodegenerative diseases (cardiovascular diseases, diabetes, and cancer, among others). OBJECTIVES: This study evaluated the functional potential of fresh blueberries and dried blueberries using forced convection by measuring phytochemical content to conclude if this drying technology is convenient for prolonging the product's shelf life. METHODS: For this purpose, antioxidant activity, phenolic content, total anthocyanins, and total flavonoids of 'Biloxi' blueberry cultivars were determined. Fresh and dried blueberries' results were studied. Fruit extracts were analyzed to determine antioxidant activity using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) as a free radical, total phenolic content with Folin-Ciocalteu reagent, total anthocyanins by pH differential method, and total flavonoids by Aluminum Chloride method. RESULTS: Results for fresh blueberries yielded ranges of antioxidant activity (90.8-93.9% Free radical scavenging rate), total phenolic content (275 to 645mgGAE/100gFW), total anthocyanins content (28.55 to 43.75mgCy3G/100gFW) and total flavonoids content (159.92 to 335.75mgQE/100gFW). For the forced convection oven process, ranges of antioxidant activity (85.5-92.6% Free radical scavenging rate), total phenolic content (261 to 308mgGAE/100gFW), total anthocyanins content (4.74 to 5.12mgCy3G/100gFW) and total flavonoids content (30.66±0.38mgQE/100gFW) were obtained. CONCLUSIONS: In general, blueberries studied proved to have similar concentrations of functional properties compared to a wide variety of cultivars grown around the globe. Furthermore, higher concentrations of phytochemical content than those reported previously for strawberries, blackberries, and raspberries were evidenced. Although dried blueberries studied proved to have diminished phytochemical content, this functional component content stands out among the fruits market and give nutritional value to end consumers. Drying processes could potentially increase the commerce of blueberries by significantly reducing their perishable nature

CONTEXTO: El contenido fitoquímico presente en los arándanos ha generado gran interés, especialmente en la industria nutra-farmacéutica donde es conocido como una "super fruta" debido a su ayuda en la prevención y tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, enfermedades cardiovasculares, diabetes, cáncer, entre otras. OBJETIVOS: Este estudio evaluó el potencial funcional de arándanos frescos y deshidratados por convección forzada mediante la determinación de su contenido fitoquímico con el objetivo de concluir si esta tecnología de secado es conveniente para aumentar la vida útil del producto. MÉTODOS: Para este propósito, se determinó la actividad antioxidante, el contenido fenólico, las antocianinas totales y los flavonoides totales de cultivos de arándanos 'Biloxi' La información recopilada de la literatura fue analizada. Se estudió el contenido en compuestos funcionales en arándanos frescos y deshidratados. Los extractos de fruta fueron analizados para determinar actividad antioxidante por medio de 2,2-Difenil-1-Picrilhidrazilo (DPPH) como radical libre, fenólicos totales con el reactivo Folin-Ciocalteu, antocianinas totales usando el método diferencial de pH y flavonoides totales con el método de Cloruro de Aluminio. RESULTADOS: Para los arándanos frescos se obtuvieron rangos de actividad antioxidante de 90.8-93.9% Tasa de captación de radicales libres, contenido fenólico total de 275-645mgEAG/100gPF, contenido de antocianinas totales de 28.55-43.75mgCy3G/100gPF y contenido total de flavonoides de 159.92-335.75mgEQ/100gPF. Para los arándanos deshidratados por convección forzada, se obtuvieron rangos de actividad antioxidante de 85.5-92.6% Tasa de captación de radicales libres, contenido fenólico total de 261-308mgEAG/100gPF, contenido de antocianinas totales de 4.74-5.12mgCy3G/100gPF y contenido total de flavonoides de 30.24-30.96mgEQ/100gPF. CONCLUSIONES: En general, los arándanos estudiados probaron tener concentraciones similares de propiedades funcionales comparados con una amplia variedad de cultivos alrededor del mundo. Además, fueron evidenciadas concentraciones más altas de contenido fitoquímico comparadas con las reportadas previamente para fresas, moras y frambuesas. Aunque los arándanos secos estudiados demostraron tener menor contenido fitoquímico, la cantidad de estos componentes funcionales destaca dentro del mercado de las frutas y dan valor nutricional a los consumidores. Los procesos de secado pueden potencialmente incrementar el comercio de arándanos derivado de una disminución significativa en su naturaleza perecedera

Inactivación del virus Zika con medio de transporte de ácidos nucleicos, potencialmente aplicable a muestras clínicas para el diagnóstico molecular de SARS-CoV-2 / Inactivation of Zika virus with nucleic acids transport media, potentially applicable to clinical samples for the molecular diagnosis of SARS-CoV-2

RESUMEN Introducción: Los medios de colecta de muestras clínicas con capacidad de desnaturalizar virus reducen los riesgos de contagio durante el transporte y procesamiento. Objetivo: Emplear el medio de transporte de ácidos nucleicos (TAN) en muestras de exudado nasofaríngeo colectadas para el diagnóstico de SARS-CoV-2. Métodos: Se realizó un estudio experimental para demostrar la capacidad del medio de inactivar la infectividad viral. Se tomó como modelo de virus envuelto el virus Zika (VZk), cuyo nivel de bioseguridad es 2. Se evaluó el desempeño clínico del medio TAN para el diagnóstico de SARS-CoV-2. Se empleó una cepa del VZk propagada en la línea celular Vero y, previo a la infección de las células, el VZk se puso en contacto a intervalos de tiempo diferentes (2; 15 y 30 min) con el medio TAN puro; y luego se realizaron diluciones seriadas (10-1-10-4). La inactivación viral se evaluó por RT-PCR, en el sobrenadante y células colectadas, al culminar el periodo de propagación. El desempeño clínico del medio TAN se estimó tomando como referencia el CITOSWAB® VTM, en 30 exudados nasofaríngeos colectados para diagnóstico de la infección por SARS-CoV-2. Resultados: El VZk preservó su infectividad a diluciones del inóculo ≥ 10-2, independientemente del tiempo de contacto. La sensibilidad y especificidad clínica del medio TAN para el diagnóstico de SARS-CoV-2 fueron del 100 %, respectivamente. Conclusiones: Los resultados sugieren que muestras clínicas positivas a VZk en diluciones ≤ 10-1 del medio TAN pueden ser manipuladas de forma segura, lo que pudiera aplicarse potencialmente al diagnóstico molecular del SARS-CoV-2.

ABSTRACT Introduction: Collection media of clinical samples with the capacity to denature viruses reduce the risk of contagion during transportation and processing. Objective: To use the nucleic acids transport media (NATM) in nasopharyngeal swab samples collected for the diagnosis of SARS-CoV-2. Methods: An experimental study was conducted to demonstrate the medium capacity to inactivate viral infectivity. Zika virus (ZIKV), of biosafety level 2, was used as an enveloped virus model. The clinical performance of the NATM for the diagnosis of SARS-CoV-2 was evaluated. A ZIKV strain propagated in the Vero cell line was used and, prior to cells infection, ZIKV was in contact at different intervals (2; 15, and 30 min) with pure NATM; subsequently, serial dilutions (10-1-10-4) were performed. Viral inactivation was evaluated by RT-PCR in the supernatant and the collected cells when the propagation period was completed. CITOSWAB® VTM was used as reference to estimate the clinical performance of the NATM in 30 nasopharyngeal swabs collected for the diagnosis of SARS-CoV-2 infection. Results: ZIKV remained infectious at inoculum dilutions of ≥ 10-2, regardless of contact time. Clinical specificity and sensitivity of the NATM for the diagnosis of SARS-CoV-2 were 100%, respectively. Conclusions: Results suggest that ZIKV positive clinical samples at dilutions ≤ 10-1 of the NATM can be safely handled, which could potentially be applied to the molecular diagnosis of SARS-CoV-2.

Ilex paraguariensis: the effect of genotypes and growth phase on biomass, secondary metabolism and antioxidant activity of in vitro cultivated calli / Ilex paraguariensis: el efecto de los genotipos y la fase de crecimiento sobre la biomasa, metabolismo secundario y la actividad antioxidante de los callos cultivados in vitro

Yerba mate ( Ilex paraguariensis ) produces several secondary metabolites of interest to the phar maceutical industry, such as chlorogenic acids and methylxanthines. These compounds have been produced in vitro by callus culture from different species. However, for I. paraguariensis , no studies upon the production of these compounds in vitro have been p erformed to date. In this work, we show that the concentration of secondary metabolites from I. paraguariensis callus is possible and highly dependent on the callus growth phase. We observed that the best phase for the production of secondary compounds in calli of yerba mate is the stationary growth phase on both genotypes tested. In this phase, higher levels of phenolic compounds, chlorogenic acid and 3,5 - dicaffeoylquinic acid and greater antioxidant activity were observed. Chlorogenic acid and 3,5 - dicaffe oylquinic acid presented positive correlation with antioxidant activity. For the first time, secondary compounds were reported in yerba mate calli cultivated in vitro .

La yerba mate ( Ilex paraguariensis ) produce varios metabolitos secundarios de interés para la industria farmacéutica, como los ácidos clorogénicos y las metilxantinas. Estos compuestos se han producido in vitro mediante cultivo de ca llos de diferentes especies. Sin embargo, para I. paraguariensis , hasta la fecha no se han realizado estudios sobre la producción de estos compuestos in vitro . En este trabajo, mostramos que la concentración de metabolitos secundarios desde callos de I. pa raguariensis es posible y altamente dependiente de la fase de crecimiento del callo. Observamos que la mejor fase para la producción de compuestos secundarios en callos de yerba mate es la fase de crecimiento estacionario en ambos genotipos probados. En es ta fase se observaron niveles más altos de compuestos fenólicos, ácido clorogénico y ácido 3,5 - dicafeoilquínico y una mayor actividad antioxidante. El ácido clorogénico y el ácido 3,5 - dicafeoilquínico presentaron correlación positiva con la actividad antio xidante. Por primera vez, se reportaron compuestos secundarios en callos de yerba mate cultivados in vitro .